解淀粉芽孢杆菌厂-解淀粉芽孢杆菌-天津坤禾生物

菌株的鉴定：对筛选得到的乳酸菌进行16s rdna序列分析，确定其种属。将活化好的菌液，解淀粉芽孢杆菌供应商，进行菌株的全基因组脱氧核糖---(deoxyribonucleic acid，解淀粉芽孢杆菌代理， dna)的提取[16]，然后对基因组dna的16s rdna区域进行pcr扩增，上游引物27f序列5′-agagtttg---ctggcctca-3′，下游引物1492r序列：5′-ggttaccttgttacgactt-3′，扩增片段为1 500 bp。pcr体系50 μl：10×buffer 5 μl；脱氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate，解淀粉芽孢杆菌， dntp) 5 μl；上游引物(25 μmol/l)0.5 μl；下游引物(25 μmol/l)0.5 μl；taq dna 聚合酶(250 u)0.5 μl；模板dna 1.5 μl ；ddh2o 37 μl。pcr扩增条件为：95 ℃ 3 min；95 ℃ 10 s；55 ℃ 30 s；72 ℃ 1 min；72 ℃ 5 min，2～4反应步骤进行30个循环。扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测其纯度及浓度，将达到测序要求的扩增产物送海华大基因进行测序，将测序结果在美国国立生物技术信息中心(national ws= for biotechnology information， ncbi)上blast进行比对，并确定其种属。

毒性: 60亿活芽孢/ml解淀粉芽孢杆菌lx-11悬浮剂---毒性测定，对大鼠---经口ld50＞5，000 mg/kg，---经皮ld50＞2，000 mg/kg，---吸入lc50＞2，解淀粉芽孢杆菌，000 mg/l；属微毒。兔皮肤、眼睛无---性；---皮肤反应（致敏性）试验结果为无致敏性；解淀粉芽孢杆菌生lx-11致病性测定，60亿活芽孢/ml解淀粉芽孢杆菌lx-11悬浮剂经小鼠经口、吸入、注射（静脉）致病性试验均属无致病性。

环境生物安全性评价：60亿活芽孢/ml解淀粉芽孢杆菌lx-11悬浮剂对斑马鱼lc50（96 h）＞3.23×103 mg a.i./l；日本鹌鹑ld50＞9，962 mg a.i./kg体重；蜜蜂经口ld50（48 h）＞4.98×105 mg a.i./l; 接触ld50（48 h）＞ 498.1 μg a.i./只；家蚕---毒性lc50（二龄）＞ 4.15×104 mg a.i./l；大型溞---活动抑制ld50（48 h）＞ 996.2 mg a.i./l；普通小球藻生长抑制eyld50（72 h）＞1，245.3 mg a.i./l; 蚯蚓---毒性lc50（14 d）＞1，992.4 mg a.i./l；均为低毒。天敌赤眼蜂风险性lr50（24 h） 2.85×103 g a.i./hm2，为低风险性。