酒精发酵阶段
按照2%---水溶液与安琪酵母粉1:7的比,将安琪酵母粉在30 ℃条件活化20 min,添加2%活化酵母液到糖化液中。再添加50%麸皮至糖化液中。添加l. plantarum和b. amyloliquefaciens菌液进行酒精发酵,添加量见表1。在(30±1) ℃条件下进行酒精发酵,解淀粉芽孢杆菌经销商,发酵时间为5 d。
解淀粉芽孢杆菌是一种与枯草芽孢杆菌亲缘性---的---,产酶量大。其在生长过程中可以产生一系列的代谢产物,对多种植物病原---及---有较好的抑制效果。对病原菌具有---作用,蔬果、瓜果病害效果非常---,解淀粉芽孢杆菌,市场发展前景---,解淀粉芽孢杆菌,更为重要的是,其为减少化学、---食品安全提供了一条有效途径。
解淀粉芽孢杆菌是具有广谱抗病作用的生。解淀粉芽孢杆菌浓缩菌粉,具有菌含量高、活性高、稳定性强等特点,施用后抗病增产效果---,可制备符合---的生物菌剂、生物有机肥、复合微生物肥等各种肥料,是各地肥料生产企业的产品。
菌株的鉴定:对筛选得到的乳酸菌进行16s rdna序列分析,确定其种属。将活化好的菌液,进行菌株的全基因组脱氧核糖---(deoxyribonucleic acid, dna)的提取[16],解淀粉芽孢杆菌,然后对基因组dna的16s rdna区域进行pcr扩增,上游引物27f序列5′-agagtttg---ctggcctca-3′,下游引物1492r序列:5′-ggttaccttgttacgactt-3′,扩增片段为1 500 bp。pcr体系50 μl:10×buffer 5 μl;脱氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dntp) 5 μl;上游引物(25 μmol/l)0.5 μl;下游引物(25 μmol/l)0.5 μl;taq dna 聚合酶(250 u)0.5 μl;模板dna 1.5 μl ;ddh2o 37 μl。pcr扩增条件为:95 ℃ 3 min;95 ℃ 10 s;55 ℃ 30 s;72 ℃ 1 min;72 ℃ 5 min,2~4反应步骤进行30个循环。扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测其纯度及浓度,将达到测序要求的扩增产物送海华大基因进行测序,将测序结果在美国国立生物技术信息中心(national ws= for biotechnology information, ncbi)上blast进行比对,并确定其种属。
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