芽孢杆菌(bacillus)是一类好氧菌,可以通过---循环途径产生有机酸。这些有机酸不仅可以使食醋中的---酸味变得柔和,还可以通过酯化反应与---形成各酯类,如乳酸---、、柠檬酸---等,从而增加食醋的风味。另外,它们还具有利用甘油产酸的能力,表明这些菌株具有多元醇的脱氢酶,此酶可将甘油脱氢产生具有淡薄的甜味的二---,解淀粉芽孢杆菌,让食醋的香味变得浓厚[8]。此外,芽孢杆菌产生的大量蛋白酶可以将蛋白质水解成---酸,这些---酸对食醋的风味和颜色起着---的作用[9]。芽孢杆菌在食醋中的应用研究较少,但是它却是---发酵中不可缺少的微生物类群之一,解淀粉芽孢杆菌代理,在食醋酿造中其对食醋的酸度、风味的提高具有一定的作用[10]。吕艳歌等[11]采用16s rdna序列分析法对山西老陈醋醋醅的产酸菌株进行鉴定,解淀粉芽孢杆菌,经分析后发现,醋醅中产酸菌主要以---杆菌、乳酸杆菌和芽孢杆菌为主。本研究通过将植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)和解淀粉芽孢杆菌(bacillus amyloliquefaciens)添加到食醋发酵体系当中,采用气相色谱-质谱法(gas chromatography-mass spectrometer, gc-ms)研究其风味物---化,进而提高食醋的品质,对于我国食醋工业的发展具有重要意义。
解淀粉芽孢杆菌对肉鸡中球蛋白的影响
iga、igm和igg作为动物机体重要的几类球蛋白,对抑制外源原菌起到重要的作用。igg占---中球蛋白总量的75%~80%,在增强细胞吞噬病原菌和抵抗等方面有重要作用。
研究显示igg对鸡的生长发育期重要的保护作用,是一类可通过母体卵黄传递的球蛋白。试验表明,微生态制剂可增强畜禽---,但也有试验显示球蛋白的数量没有发生变化。本试验发现,肉鸡饲喂解淀粉芽孢杆菌后中igg和igm在其生长后期均有---升高,iga没有---性变化。也发现高剂量的解淀粉芽孢杆菌---增加了35日龄肉鸡中igg和iga的浓度,igm的浓度并没有---性改变。另外,解淀粉芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌亲缘性较高,后者在试验中显示可促进动物发育,增加淋巴细胞数量,提高---和细胞等。但目前日粮中添加解淀粉芽孢杆菌对肉鸡球蛋白影响的研究较少,且、添加量、试验动物和饲喂方式等因素均会产生不同结果,因此具体机理还需进一步研究。
菌株的鉴定:对筛选得到的乳酸菌进行16s rdna序列分析,确定其种属。将活化好的菌液,进行菌株的全基因组脱氧核糖---(deoxyribonucleic acid, dna)的提取[16],然后对基因组dna的16s rdna区域进行pcr扩增,上游引物27f序列5′-agagtttg---ctggcctca-3′,下游引物1492r序列:5′-ggttaccttgttacgactt-3′,扩增片段为1 500 bp。pcr体系50 μl:10×buffer 5 μl;脱氧核糖核苷酸三磷酸(deoxy-ribonucleoside triphosphate, dntp) 5 μl;上游引物(25 μmol/l)0.5 μl;下游引物(25 μmol/l)0.5 μl;taq dna 聚合酶(250 u)0.5 μl;模板dna 1.5 μl ;ddh2o 37 μl。pcr扩增条件为:95 ℃ 3 min;95 ℃ 10 s;55 ℃ 30 s;72 ℃ 1 min;72 ℃ 5 min,2~4反应步骤进行30个循环。扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测其纯度及浓度,将达到测序要求的扩增产物送海华大基因进行测序,解淀粉芽孢杆菌供应商,将测序结果在美国国立生物技术信息中心(national ws= for biotechnology information, ncbi)上blast进行比对,并确定其种属。
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